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RT-PCR技術(shù)服務(wù)

RT-PCR技術(shù)服務(wù)

簡要描述:
RT-PCR技術(shù)服務(wù),反轉(zhuǎn)錄·聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(reverse transcription )和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。

更新時間:2024-08-06

訪問量:1279

廠商性質(zhì):其他

RT-PCR技術(shù)服務(wù)的核心步驟包括

RNA提取:從組織或細胞等樣本中提取RNA,確保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染。

反轉(zhuǎn)錄(RT):在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板合成cDNA的第一鏈。這一步驟通常使用隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物中的一種。

PCR擴增:以cDNA為模板,在DNA聚合酶的作用下進行PCR擴增,得到目的片段。

 

RT-PCR技術(shù)服務(wù)的注意事項:

避免RNA酶污染:RNA酶會降解RNA,影響實驗結(jié)果。因此,在操作過程中應(yīng)使用RNA酶抑制劑,并確保所有器皿和試劑無RNA酶污染。

選擇合適的引物:引物的選擇對實驗結(jié)果至關(guān)重要。應(yīng)根據(jù)實驗的具體情況選擇合適的引物,如隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物。

控制反應(yīng)條件:不同來源的逆轉(zhuǎn)錄酶反應(yīng)溫度有所不同,應(yīng)根據(jù)所選逆轉(zhuǎn)錄酶的要求設(shè)置合適的反應(yīng)條件。

 

RT-PCR技術(shù)服務(wù)的應(yīng)用:

基因表達研究:通過檢測細胞中特定基因mRNA的含量,可以評估該基因的表達水平。

病毒檢測:RT-PCR技術(shù)可用于檢測細胞中的RNA病毒,如SARS-CoV-2等。

基因克隆:通過RT-PCR技術(shù)可以直接克隆特定基因的cDNA序列,為后續(xù)的基因功能研究提供基礎(chǔ)





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